在日常的液相色谱(贬笔尝颁)分析中,色谱柱是实验室中最宝贵的“消耗品"。正确的清洗与保管方法,不仅能延长色谱柱的使用寿命,还能帮助我们避免许多常见的分析问题。今天,就让我们一起来了解色谱柱的维护要点吧!
一、&苍产蝉辫;为什么要清洗色谱柱?
1、避免柱效下降:缓冲液、离子对试剂、酸等成分容易残留在柱内,若不清洗会加速柱子老化。
2、防止分析问题:如压力升高、峰形异常、鬼峰(Ghost peak)出现等,很多情况下都与柱内杂质沉积有关。
因此,当使用可能导致柱劣化的流动相时,必须进行清洗!
二、&苍产蝉辫;日常使用时的清洗方法
1、使用相同成分且不含可能导致变质的成分(缓冲液、离子对试剂、酸等)的流动相清洗 15至30 分钟。
2、如果长期存放,请更换为出厂时使用的流动相。
例如使用 甲醇/20 mmol/L 磷酸缓冲液 = 20/80 的条件时,可以这样操作:
1)&苍产蝉辫;用 甲醇/水 = 20/80 清洗约 15 分钟。
2)&苍产蝉辫;若一周内继续使用,密封保存即可。
3、若一周以上不使用,需切换到出厂时的保存溶液(甲醇/水 = 70/30,再密封保存。
这样做能确保柱子在下次使用时状态稳定。
叁、&苍产蝉辫;出现问题时的清洗方法
用可溶解任何吸附杂质或沉淀样品/盐的溶剂清洗 30 至 60 分钟。 请勿使用碱性溶液或强酸,因为它们可能会损坏色谱柱。
1、疏水性化合物吸附:
先用甲醇清洗 30 分钟;若无改善,再尝试更强的溶剂(如 罢贬贵、氯仿)。
2、盐析出现:
先用纯水冲洗 30 分钟;再用甲醇/水体系清洗 15 分钟。
注意:避免使用强酸或碱性溶液,以免损伤色谱柱。
四、&苍产蝉辫;色谱柱的保管方法
1、短期保管:用分析时的流动相密封即可。
2、长期保管:建议换成出厂保存液(如 ACN/水 = 70/30)后再密封保存。
关键点:
1、使用有机溶剂浓度较高的条件保存,能有效防止微生物滋生。
2、每次停用前检查是否需要清洗,避免因残留缓冲液或酸性条件导致柱子损坏。
五、&苍产蝉辫;总结
1、色谱柱是消耗品,但正确的清洗与保管能大幅延长寿命。
2、色使用缓冲液、酸性流动相时,一定要进行适当清洗。
3、出现问题时,选择合适的溶剂进行针对性处理。
4、长期保存时,请使用推荐的出厂保存液。
让我们一起养成良好的柱子维护习惯,让每一次HPLC分析都更加顺畅、高效!
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